Principe du synthétiseur Oligo
Dans les domaines de la recherche en biologie moléculaire et en génétique, la capacité à synthétiser l’ADN joue un rôle crucial.La synthèse de l'ADN implique la production artificielle de molécules d'ADN en disposant les nucléotides dans un ordre spécifique.Pour y parvenir, les scientifiques s’appuient sur un outil puissant appelé synthétiseur d’oligonucléotides, également appelé synthétiseur d’ADN.
Un synthétiseur d'oligonucléotides est un instrument sophistiqué qui synthétise automatiquement de courtes molécules d'ADN appelées oligonucléotides.Ces courts brins d'ADN mesurent généralement entre 10 et 100 nucléotides et constituent des éléments de base essentiels dans une grande variété d'applications, notamment la réaction en chaîne par polymérase (PCR), la synthèse génétique, le génie génétique et le séquençage de l'ADN.
Les synthétiseurs d'oligonucléotides fonctionnent sur le principe d'une technique connue sous le nom desynthèse en phase solide.Cette méthode a été mise au point pour la première fois par le Dr Marvin Caruthers, lauréat du prix Nobel, dans les années 1970 et a été affinée au fil des ans pour améliorer la synthèse des séquences d'ADN.La synthèse des oligonucléotides est réalisée par une addition progressive de résidus nucléotidiques à l'extrémité 5' de la chaîne en croissance jusqu'à ce que la séquence souhaitée soit assemblée.Chaque ajout est appelé cycle de synthèse et comprend quatre réactions chimiques :
Étape 1 : Déblocage (détritylation) ---------Étape 2 : Couplage ---------Étape 3 : Coiffage -----------Étape 4 : Oxydation
Ce processus est répété pour chaque nucléotide jusqu'à ce que la séquence souhaitée soit obtenue.Pour les oligonucléotides plus longs, ce cycle peut devoir être répété plusieurs fois pour synthétiser la séquence entière. La capacité de contrôler avec précision chaque étape du cycle de synthèse est essentielle pour un synthétiseur d’oligonucléotides.Les réactifs utilisés, tels que les nucléotides et les activateurs, doivent être de haute qualité pour garantir une synthèse précise et efficace.De plus, les synthétiseurs nécessitent un contrôle de température de haute précision et d’autres conditions environnementales pour favoriser les réactions de couplage souhaitées et empêcher les réactions indésirables.
Une fois qu'un oligonucléotide est entièrement synthétisé, il est généralement clivé du support solide et purifié pour éliminer tous les groupes protecteurs ou impuretés restants.Les oligonucléotides purifiés sont alors prêts pour les applications en aval.
Les progrès technologiques ont permis le développement de synthétiseurs d’oligonucléotides à haut débit capables de synthétiser simultanément des centaines, voire des milliers d’oligonucléotides.Ces instruments utilisent une technologie de synthèse basée sur des puces à ADN, permettant aux chercheurs de générer rapidement de grandes bibliothèques d'oligonucléotides à des fins de recherche diverses.
En résumé, les principes qui sous-tendent les synthétiseurs d’oligonucléotides tournent autour des techniques de synthèse en phase solide, qui impliquent l’ajout progressif de nucléotides sur un support solide.Un contrôle précis du cycle de synthèse et des réactifs de haute qualité sont essentiels pour une synthèse précise et efficace.Les synthétiseurs d'oligo jouent un rôle essentiel dans la recherche sur l'ADN, permettant aux scientifiques de générer des oligonucléotides personnalisés pour diverses applications, contribuant ainsi aux progrès de la biotechnologie et de la recherche génétique.
Heure de publication : 01 août 2023